Preiskava Krvi V Parazitologiji

Kazalo:

Preiskava Krvi V Parazitologiji
Preiskava Krvi V Parazitologiji

Video: Preiskava Krvi V Parazitologiji

Video: Preiskava Krvi V Parazitologiji
Video: Откровения. Квартира (1 серия) 2024, Marec
Anonim

Enzimski imunosorbentni test se opravi, kadar se pojavijo težave z diagnozo, če ima bolnik dedno nagnjenost k nekaterim boleznim, da se oceni učinkovitost zdravljenja. ELISA je sodoben laboratorijski test, ki pomaga prepoznati specifična protitelesa v krvi za določene bolezni. Metoda je zelo specifična in občutljiva.

Vsebina članka:

  • 1 Imunološki test
  • 2 Osnovni pojmi in princip encimske imunoanalize
  • 3 Različni razredi protiteles IgG, IgM, IgA

    • 3.1 protitelesa IgM
    • 3.2 Protitelesa IgG
    • 3.3 protitelesa IgA
  • 4 Prednosti metode
  • 5 Slabosti metode
  • 6 Indikacije za imenovanje in odkrivanje bolezni
  • 7 Analizirani biomaterial in značilnosti njegovega zbiranja
  • 8 Pogoji pripravljenosti rezultatov ELISA
  • 9 Razlaga encimskega imunološkega testa
  • 10 Možni rezultati ELISA
  • 11 Za zaključek

Preizkus imunosorbentov

Kaj je analiza ELISA
Kaj je analiza ELISA

Analiza razkriva antigene, značilne za nekatere patogene in protitelesa nanje. Enzimski imunosorbentni test temelji na reakciji interakcije antigena s specifičnim protitelesom, zaradi česar nastane kompleks, ki ima v svoji sestavi posebno oznako, ki spreminja barvo vzorca pod delovanjem reagenta.

Intenzivnost obarvanja omogoča presojo o prisotnosti protiteles ali antigenov, značilnih za določeno okužbo, in že s pomočjo opreme določimo njihovo količino. Antigeni so tuje snovi, ki v telesu povzročajo imunsko obrambno reakcijo - nastajajo specifični proteini (imunoglobulini).

Vsak patogen ima svoj nabor antigenov, specifičen je tudi imunski odziv nanje. Glavni material za analizo je kri iz vene.

Enzimski imunosorbentni test omogoča identifikacijo latentnih bolezni z visoko natančnostjo v zgodnji fazi, zdravnika obvestiti o splošnem stanju pacienta in o tveganjih za nastanek patologij, o stanju reproduktivnega zdravja.

Izvede se analiza za diagnosticiranje virusnih bolezni: herpes, hepatitis, citomegalovirus, virus Epstein-Barr itd., Spolno prenosljive okužbe: gonoreja, ureaplazma, klamidoza, mikoplazma, trichomonas, sifilis, za določitev hormonske ravni, diagnosticiranje raka in imunska pomanjkljivost, odkrivanje in zdravljenje alergij. Za analizo lahko poleg krvi vzamete tudi cerebrospinalno tekočino, amnijsko tekočino in vsebino steklastega telesa.

Analiza predvideva uporabo skupine ELI testov:

  • Test ELI-B, ki omogoča sklep o stanju imunskega sistema;
  • ELI-Dia-test, ki določa stanje endokrinega sistema. Z njegovo pomočjo se diagnosticira diabetes prve in druge vrste;
  • ELI-N-Complex-12, ki obvešča o stanju perifernega in centralnega živčnega sistema;
  • ELI-Ankor-test-12, analiza, ki ocenjuje stanje srca in ožilja, oceni tveganje za nastanek možganske kapi, srčnega infarkta;
  • ELI-Viscero-16 se naredi za oceno splošnega stanja pacienta. Ta test omogoča diagnostiko 16 kazalnikov: črevesje, živčni sistem, miokard, ledvice, imunski sistem, jetra, želodec itd.;
  • ELI-P-kompleks-12 je narejen za oceno reproduktivne sposobnosti telesa;
  • ELI-GIT-12 - analiza, ki oceni stanje prebavil in omogoča predvidevanje tveganja za nastanek patologij;
  • ELI-HCG-APS test razkriva motnje reproduktivnega zdravja.

Osnovni pojmi in načelo encimske imunoanalize

Encimski imunosorbentni test (ELISA) je laboratorijska diagnostična metoda, ki temelji na reakciji "antigen-protitelo", ki omogoča odkrivanje beljakovinskih snovi (vključno z encimi, virusi, bakterijskimi fragmenti in drugimi sestavinami bioloških tekočin). Da bi razumeli, kako deluje imunski test za encime, poskusimo razumeti bistvo reakcije "antigen-protitelo". Antigen je molekula tuje telesu, običajno beljakovinskega izvora, ki lahko vstopi v človeško telo skupaj z povzročiteljem infekcije.

Delci krvi nekoga drugega (če se ne ujema z našo skupino) so tudi antigeni. V telesu so antigeni sposobni povzročiti imunski odziv, namenjen zaščiti celovitosti notranjega okolja pred tujimi snovmi. Zato naše telo sintetizira posebne snovi - protitelesa (imunoglobulini), ki se lahko povežejo z antigeni po principu "ključ do zaklepanja" in jih vežejo v imunski kompleks (ta proces se imenuje reakcija "antigen-protitelo").

Preizkus imunosorbentov. Takšne imunske komplekse imunske celice lažje prepoznajo in uničijo. Obstaja več vrst protiteles, od katerih vsako začne delovati v določeni fazi imunskega odziva. Tako se imunoglobulini razreda M (IgM) najprej sintetizirajo kot odgovor na prodiranje antigena v telo.

Vsebnost teh protiteles je najvišja v prvih dneh infekcijskega procesa. Po njih imunski sistem v kri sprosti imunoglobuline razreda G (IgG), ki pomagajo pri uničevanju antigenov, dokler okužba ni popolnoma premagana, in tudi v prihodnje krožijo po žilah, kar zagotavlja odpornost proti ponovni okužbi.

Cepljenje temelji na tem fenomenu: zahvaljujoč cepljenjem, ki vsebujejo oslabljene antigene mikrobov in virusov, se v naši krvi pojavi velika količina IgG, ki ob stiku z resnično grožnjo hitro zatira okužbo - preden škoduje zdravju. Obstajajo tudi imunoglobulini razreda A (v velikih količinah jih najdemo v sluznicah, ki ščitijo "pristope" do telesa), E (boj proti parazitskim okužbam) in druge.

Kaj je analiza ELISA
Kaj je analiza ELISA

Pri laboratorijski diagnostiki so najbolj zanimivi predmeti IgM, IgG in IgA: s koncentracijo je mogoče oceniti, v kateri fazi je nalezljiv proces, in tudi ugotoviti, ali je človek kdaj zbolel za eno ali drugo boleznijo (na primer rdečkami ali noricami). Kako veste, kateri antigeni ali protitelesa so prisotni v človeškem telesu? Ko zdravnik sumi, da je določena okužba vzrok bolezni, ali želi izmeriti koncentracijo določenega hormona, bolniku predpiše encimski imuno test.

Reakcija "antigen-protitelo" se lahko reproducira v laboratorijskih pogojih: uporabite pripravljena protitelesa ali antigene, da ugotovite, ali je v preskušenem vzorcu prisotna ustrezna spojina. Najprej morate dobiti vzorec biološke tekočine - ponavadi krvni serum. Laboratorij uporablja plastične plošče z vdolbinicami, ki že vsebujejo očiščene antigene sumljivega patogena (ali protitelesa, če je naloga iskanje antigena).

Vzorci so postavljeni v vdolbinice, v katerih se tvorijo - ali ne - imunski kompleksi. Če je prišlo do "srečanja", začne posebno barvilo v encimski reakciji s kombinirano molekulo, ki omogoča sklep o rezultatih analiz z instrumentalno oceno optične gostote.

ELISA je kvalitativna in kvantitativna. V prvem primeru je mišljen nedvoumen odgovor: v vzorcu najdemo želeno snov ali je ne najdemo.

V primeru kvantitativne analize bolj zapletena veriga reakcij omogoča oceno koncentracije protiteles v človeški krvi, ki bo v primerjavi z rezultati prejšnjih testov odgovorila na vprašanje, kako se razvija infekcijski proces. Zanimivo je, da je predhodnik encimskega imunoanalize bil radioimunoanaliza, ki je za označevanje uspešne reakcije uporabila označena protitelesa in antigene. Ker je izvajanje takšne diagnostike predstavljalo potencialno grožnjo za zdravje laboratorijskega osebja, so znanstveniki začeli iskati varno alternativo za "obarvanje" vzorcev. Tako je bil leta 1971 izumljen IFA.

Različni razredi protiteles IgG, IgM, IgA

Kaj je analiza ELISA
Kaj je analiza ELISA

Z encimsko povezan imunosuorben test zazna protitelesa okužb, ki pripadajo različnim razredom Ig (G, A, M). Protitelesa proti virusu se ob prisotnosti okužbe določijo v zelo zgodnji fazi, kar zagotavlja učinkovito diagnozo in nadzor poteka bolezni. Najpogostejši načini za diagnosticiranje okužb so testi na protitelesa IgM (akutna faza okužbe) in protitelesa IgG (odporna imunost na okužbo). Ta protitelesa so določena za večino okužb.

Vendar pa eden najpogostejših testov - bolnišnični pregledi (testi na HIV, sifilis in hepatitis B in C) ne razlikujejo vrste protiteles, saj prisotnost protiteles proti virusom teh okužb samodejno kaže na kronični potek bolezni in je na primer kontraindikacija za resne kirurške posege. Zato je pomembno, da diagnozo ovržemo ali potrdimo.

Preizkus imunosorbentov. Podrobna diagnoza vrste in količine protiteles pri diagnosticirani bolezni se lahko opravi z analizo posamezne okužbe in vrste protiteles. Primarna okužba se odkrije, ko se v vzorcu krvi odkrije diagnostično pomembna raven protiteles IgM ali znatno poveča število protiteles IgA ali IgG v parnih serumih, odvzetih v intervalu 1-4 tedne.

Ponovna okužba ali ponovna okužba se odkrije s hitrim zvišanjem ravni protiteles IgA ali IgG. Protitelesa IgA so pri starejših bolnikih višja in natančneje diagnosticirajo trenutno okužbo pri odraslih.

Pretekla okužba v krvi je opredeljena kot povečana protitelesa IgG brez povečanja koncentracije v parnih vzorcih, odvzetih v intervalu 2 tednov. Hkrati ni protiteles razredov IgM in A.

Protitelesa IgM

Kaj je analiza ELISA
Kaj je analiza ELISA

Njihova koncentracija narašča kmalu po bolezni. Protitelesa IgM odkrijemo že 5 dni po nastanku in dosežejo vrhunec v intervalu od enega do štirih tednov, nato pa v več mesecih tudi brez zdravljenja upadejo na diagnostično nepomembne ravni. Vendar za popolno diagnozo ni dovolj določiti samo protiteles razreda M: odsotnost protiteles tega razreda ne pomeni odsotnosti bolezni. Akutne oblike bolezni ni, je pa lahko kronična.

Protitelesa IgM so zelo pomembna pri diagnozi hepatitisa A in otroških okužb (rdečk, hroščev kašelj, norice), ki se zlahka prenašajo po kapljicah v zraku, saj je pomembno, da bolezen čim prej prepoznamo in bolno izoliramo.

Protitelesa IgG

Glavna vloga protiteles IgG je dolgotrajna zaščita telesa pred večino bakterij in virusov - čeprav se njihova proizvodnja odvija počasneje, odziv na antigenski dražljaj ostaja bolj stabilen kot odziv na protitelesa razreda IgM.

Preizkus imunosorbentov. Ravni protiteles IgG naraščajo počasneje (15-20 dni po začetku bolezni) kot IgM, vendar ostanejo povišane dlje časa, zato lahko kažejo na dolgotrajno okužbo, če protiteles IgM ni. Ravni IgG so lahko nizke več let, toda ob ponavljajoči se izpostavljenosti istemu antigenu ravni IgG protiteles hitro narastejo.

Za popolno diagnostično sliko je potrebno hkrati določiti protitelesa IgA in IgG. Če rezultat IgA ni jasen, potrdite z določitvijo IgM. V primeru pozitivnega rezultata in natančne diagnoze je treba za določitev zvišanja koncentracije IgG vzporedno preveriti drugi test, opravljen 8-14 dni po prvem. Rezultate analize je treba razlagati v povezavi z informacijami, pridobljenimi v drugih diagnostičnih postopkih.

Zlasti protitelesa IgG se uporabljajo za diagnosticiranje Helicobacter pylori, enega od vzrokov za razjede in gastritis.

Protitelesa IgA

V serumu se pojavijo 10-14 dni po začetku bolezni, sprva jih lahko najdemo celo v semenskih in vaginalnih tekočinah. Če je zdravljenje uspešno, se protitelesa IgA običajno zmanjšajo za 2-4 mesece po okužbi. Po ponovni okužbi se raven protiteles IgA ponovno poveča. Če raven IgA po zdravljenju ne pade, potem je to znak kronične oblike okužbe.

Prednosti metode

Nesporne prednosti ELISA so velika občutljivost in specifičnost metode. Občutljivost je sposobnost prepoznavanja ciljne snovi, tudi če je njena koncentracija v vzorcu nizka. Po drugi strani specifičnost pomeni diagnozo brez napak: če je rezultat pozitiven, pomeni, da je bilo ugotovljeno točno protitelo ali antigen, in ne nekateri drugi.

Encimski imunosorbentni test je v veliki meri nadomestil "zlati standard" mikrobiologije - bakteriološko diagnostično metodo, med katero je bilo treba za identifikacijo patogena izolirati iz telesa in nato gojiti kulturo na hranilnem mediju v epruveti. Ves čas med izvajanjem analize so bili zdravniki prisiljeni bolnika zdraviti "na slepo", ugibajoč o izvoru mikroorganizma po simptomih bolezni.

Določanje IgM z ELISA vam omogoča natančno diagnozo že v prvih dneh bolezni. Visoka stopnja predelave encimskega imunoanalize zmanjšuje vpliv človeškega faktorja, kar zmanjšuje verjetnost napake. Večina testnih kompletov in reagentov ELISA, ki se uporabljajo v sodobnih laboratorijih, je izdelanih v industrijskem okolju, kar zagotavlja natančen rezultat.

Slabosti metode

Kaj je analiza ELISA
Kaj je analiza ELISA

Na žalost morate za izvedbo ELISA vedeti, kaj natančno iskati: metoda analize pomeni, da ima zdravnik predhodno domnevo o naravi bolezni. Zato nima smisla predpisovati takšnega testa v upanju, da bi slučajno "uganili" diagnozo. V primeru diagnosticiranja nalezljivih bolezni encimski imunološki test ne more najti patogena in določiti njegovih specifičnih lastnosti: nakazuje le prisotnost protiteles v pacientovi krvi, posredno pa kaže na prisotnost tujega mikroorganizma v človeškem telesu.

ELISA je izjemno natančna, vendar ne poceni metoda, zato jo morate pametno uporabiti, usposobljeni zdravnik pa naj rezultate razlaga.

Indikacije za imenovanje in odkrite bolezni

Celotnega seznama indikacij za ELISA ni mogoče pokriti. Najpogostejši nameni analize so: Diagnoza akutnih in kroničnih nalezljivih bolezni:

  • IgM in IgG do virusnega hepatitisa A, B, C, E, kot tudi antigene hepatitisa B in C;
  • IgG do HIV; Ig M in IgG do citomegalovirusne okužbe;
  • Ig M in IgG do virusa Epstein-Barr; Ig M in IgG do herpes okužb;
  • Ig M in IgG do toksoplazmoze;
  • Ig M in IgG proti ošpicam, rdečkam, salmonelozo, dizenteriji, klopnemu encefalitisu in drugim boleznim;
  • IgG proti parazitskim boleznim;
  • Ig M in IgG do spolno prenosljivih okužb;
  • IgG do Helicobacter pylori okužba.

Splošna ocena kazalcev človeške imunosti in markerjev nekaterih avtoimunskih bolezni. Identifikacija onkoloških markerjev (faktor nekroze tumorja, antigen, specifičen za prostato, rak-embrionalni antigen in drugi). Določitev vsebnosti hormonov v krvnem serumu (progesterona, prolaktina, testosterona, ščitničnega stimulirajočega hormona in drugih).

Analizirani biomaterial in značilnosti njegovega zbiranja

Kaj je analiza ELISA
Kaj je analiza ELISA

Glavni biomaterial za ELISA je krvni serum: v laboratoriju se bolniku odvzame vzorec krvi iz vene, iz katerega se dalje odstranijo oblikovani elementi, ki zapletejo analizo. V nekaterih drugih primerih se za analizo uporabljajo cerebrospinalna tekočina, amnijska tekočina, razmazi sluznice itd.

Da bi se izognili izkrivljanju rezultatov, priporočamo darovanje krvi na prazen želodec, dva tedna pred raziskavo (če je cilj diagnosticiranje kroničnih, latentnih nalezljivih bolezni) pa je treba prenehati jemati antibiotike in protivirusna zdravila. Pogoji pripravljenosti rezultatov ELISA Če imate potrebne reagente in dobro organizacijo laboratorija, boste rezultate testa prejeli v 1-2 dneh po odvzemu krvi. V nekaterih primerih se lahko v primeru nujnega odziva to obdobje skrajša na 2-3 ure.

Rezultati IFA so pripravljeni

Če imate potrebne reagente in dobro organizacijo laboratorija, boste rezultate testa prejeli v 1-2 dneh po odvzemu krvi. V nekaterih primerih se lahko v primeru nujnega odziva to obdobje skrajša na 2-3 ure.

Dekodiranje encimskega imunološkega testa

Rezultat kakovostne analize ELISA bo nedvoumna razsodba: v vzorcu najdemo želeno snov ali je ne najdemo. Če govorimo o kvantitativni analizi, potem lahko koncentracijo izrazimo kot številčno vrednost ali določeno število znakov "+" (od enega do več).

Analizirani kazalci:

  • IgM - prisotnost tega razreda imunoglobulinov kaže na akutni nalezljivi proces v telesu. Odsotnost IgM lahko kaže tako na odsotnost specifičnega patogena v telesu kot na prehod okužbe na kronično stopnjo.
  • IgA z negativnim testom IgM najpogosteje kaže na kronično ali latentno okužbo. IgM in IgA (skupna prisotnost) - dva pozitivna rezultata kažeta na višino akutne faze bolezni.
  • IgG govori bodisi o kroničnosti bolezni bodisi o okrevanju in razvoju imunosti proti povzročitelju bolezni.

Možni rezultati ELISA

Kaj je analiza ELISA
Kaj je analiza ELISA

Odvisno od vsebine analize lahko obrazec poda podatke v obliki tabele, v kateri so navedena vsa protitelesa ali antigeni z opombami o negativni ali pozitivni reakciji, ali pa bo navedena kvantitativna vrednost rezultata (negativna, šibko pozitivna, pozitivna ali močno pozitivna). Slednja možnost določa, koliko protiteles je v analiziranem vzorcu. Drugi količinski kazalnik je indeks avidnosti protiteles, izražen v odstotkih.

Nakazuje, koliko časa je minilo od začetka nalezljivega procesa (višji kot je indeks, več).

Danes proizvajajo na tisoče vrst testnih sistemov ELISA, ki omogočajo odkrivanje specifičnih protiteles in antigenov pri najrazličnejših patologijah.

Zato se ta analiza uporablja v skoraj vseh medicinskih panogah. Diagnoza, postavljena s pomočjo ELISA, je zagotovilo za imenovanje ustrezne terapije in učinkovito zdravljenje bolezni.

Končno

Včasih, ko v rezultatih testov odkrijejo protitelesa IgG, na primer toksoplazmoza ali herpes, pacienti panijo, saj ne vidijo, da protitelesa IgM, ki kažejo na prisotnost trenutne okužbe, sploh niso prisotna. V tem primeru analiza govori o predhodni okužbi, do katere se je razvila imunost.

Vsekakor je razlago rezultatov analize bolje zaupati zdravniku in z njim po potrebi določiti taktiko zdravljenja.

Izvedi več:

  • Analiza za skupino: kaj je, priprava in izvedba
  • Analiza iztrebkov zaradi dizenterije: kako jemati, izrazi in metode
  • Analiza za toksoplazmozo: zakaj in kako jemati pravilno

Priporočena: